Unterabschnitte

• Formolfixierung
• Bouin-Fixierung
• FEA - Fixierer
• Glutaraldehyd-Fixierung

Fixierungen

Formolfixierung

Hühnchen und Insekten: Zunächst in 37% Formol 1 Stunde fixieren. Die Präparate dann in 5% Formol überführen und darin aufbewahren. Andere Keime werden direkt in 5% Formol fixiert und aufbewahrt. Präparate, die histologisch bearbeitet werden sollen, müssen baldmöglichst weiterverarbeitet werden, da das Gewebe in Formol gehärtet wird.

Bouin-Fixierung

Rezeptur
15	Teile	Pikrinsäure (vorhandene gesättigte Lösung benutzen!)
5	Teile	Formol 37%
1	Teil	Eisessig

Die Präparate werden in heißem Bouin 1 Std. fixiert. Beim Erhitzen ist Vorsicht geboten, daß keine Spritzer an die Haut kommen !!

Unbedingt eine Schutzbrille benutzen!

Wichtig: Für Bouin ein markiertes Gefäß benutzen! (Bei späterer Verwendung dieses Gefäßes für Keimaufzucht würde sich sonst die Pikrinsäure lösen und zu Schädigungen der Keime führen.) Nach 1 Std. werden die Präparate in 70% Alkohol überführt. Die gelbe Färbung kann bei späteren Anfärbungen stören, sie muß dann durch mehrere Portionen 80% Ethanol entfernt werden. Ein Zusatz von einem Tropfen konzentrierter Ammoniak-Lösung auf 100 ml 80% Ethanol beschleunigt die Entfärbung.

FEA - Fixierer

(Formol - Eisessig - Alkohol): Zum Fixieren von Embryonen. Kann als Ersatz für Bouin benutzt werden.

Rezeptur
10	ml	40% Formalin (mit Leitungswasser herstellen)
10	ml	Eisessig
80	ml	90%-iger Ethanol (vergällt)
1-2 100 ml

Nicht länger als 24 h fixieren um Schrumpfungen zu vermeiden. Bei kleinen Objekten (etwa Embryonen von Mäusen) genügen 4-5 Stunden. Nachbehandlung: mit 80%-igen Alkohol auswaschen (mehrmals wechseln). Aufbewahren in 70% Ethanol. Ansonsten wie üblich weiterbehandeln.

Glutaraldehyd-Fixierung

Dieser Fixierer ist immer frisch anzusetzen. Fixiert wird immer mit eiskalter Lösung (4 C). Der Ansatz wird nur im Histolabor unter dem Abzug hergestellt!

Rezeptur
2	Teile	Glutaraldehyd (25% )
23	Teile	0,1 M Phosphat-Puffer (PBS, siehe )

Fixierungszeit 1 Stunde, anschließend die Präparate in eiskalten PBS überführen.